這篇論文研究了綠原酸（Chlorogenic acid, CHA）通過將巨噬細胞從M2表型極化轉變為M1表型來抑制膠質母細胞瘤生長的機制。

CHA 對白細胞介素 (IL)-4 誘導的巨噬細胞標志物表達的影響

研究背景

1、膠質母細胞瘤（GBM）是一種極具侵襲性的腦腫瘤，預后極差，患者生存期通常不超過15個月，即使經過手術切除和常規的化療、放療，效果也不理想。

2、GBM的免疫微環境在其進展和轉移中起著關鍵作用，特別是小膠質細胞/巨噬細胞的浸潤。如何通過調節巨噬細胞的極化狀態來抑制腫瘤生長是一個重要的研究難點。

3、現有研究表明，綠原酸（CHA）在多種惡性腫瘤中具有抗腫瘤效應，但其具體機制尚不明確，特別是在調節巨噬細胞極化方面的作用。

研究方法

1、體外實驗：使用LPS/IFNγ和IL-4分別誘導M1和M2巨噬細胞極化，檢測CHA對其極化狀態的影響。通過RT-PCR分析M1和M2標記基因的表達變化，使用流式細胞術檢測細胞表面標志物的表達。

2、體內實驗：在G422膠質瘤異種移植小鼠模型中，評估CHA對腫瘤生長的抑制作用，并通過流式細胞術和免疫熒光染色分析腫瘤組織中M1和M2巨噬細胞的分布。

實驗設計

1、在體外實驗中，CHA處理顯著增加了LPS/IFNγ誘導的M1標記基因（如iNOS、MHC II和CD11c）的表達，并減少了IL-4誘導的M2標記基因（如Arg1和CD206）的表達。具體來說，CHA在1 μM濃度下顯著增加了Ana-1細胞中iNOS mRNA水平，并減少了Arg1 mRNA水平（P ≤ 0.05）。

2、在體內實驗中，CHA處理的小鼠腫瘤重量顯著減少，腫瘤抑制率在20 mg/kg和40 mg/kg劑量組分別為30%和48%（P ≤ 0.05）。CHA處理的小鼠腫瘤組織中CD11c+ M1巨噬細胞比例增加，而CD206+ M2巨噬細胞比例減少。

結果與分析

1、CHA通過促進STAT1信號通路激活和抑制STAT6信號通路激活來調節巨噬細胞的極化狀態。具體來說，CHA顯著增加了p(Tyr701)-STAT1和p(Ser727)-STAT1的表達，并減少了p(Tyr641)-STAT6的表達（P ≤ 0.05）。

2、在共培養實驗中，CHA顯著抑制了M2巨噬細胞對腫瘤細胞的促增殖作用，并增強了M1巨噬細胞的抗腫瘤效應。CHA處理后，U87膠質瘤細胞的形態變為凋亡樣圓形。

總體結論

1、CHA通過抑制M2極化和促進M1極化，調節巨噬細胞的極化狀態，從而抑制膠質母細胞瘤的生長。具體機制包括促進STAT1信號通路激活和抑制STAT6信號通路激活。

2、這篇論文首次展示了CHA通過調節巨噬細胞極化來抑制膠質母細胞瘤的生長，提供了新的治療思路和方法。

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